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缓冲液和储备溶液

发布者:米乐app下载(中国)官网 科技    发布时间:2021-05-10     
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酶联免疫吸附试验(ELISA)


碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液(100mM) pH9.6

抗原或抗体应用包被缓冲液稀释,以使其固定在孔内:

? 29mM 碳酸钠

? 71mM 碳酸氢钠


封闭液:

常用的封闭试剂为1% 牛血清白蛋白、血清、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶,用PBS 溶解。


洗涤液:

常用PBS 或含去垢剂(如体积百分数0.05% 吐温20)的三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH 7.4) (TBST)


抗体稀释缓冲液:

一抗和二抗应用1 倍的封闭液稀释,以减少非特异结合。


流式细胞术


荧光激活细胞分类检测(FACS)缓冲液/抗体稀释缓冲液

10% 胎牛血清

1% 叠氮化纳

溶解于PBS 中


细胞穿透液


0.1-1% 聚乙二醇辛基苯基醚/乙基苯基聚乙二醇

溶解于PBS 中,也可用吐温20,皂甙,洋地黄皂甙和Leucoperm 等温和的细胞膜溶解物。使用浓度0.5%,溶解于PBS 中


固定液

0.01%-0.1% 多聚甲醛,溶解于PBS 中


免疫沉淀(IP)


缓冲液配制方法见免疫印迹(western blot)部分

RIPA(放射性免疫测定)缓冲液

缓冲液配制方法见免疫印迹部分


染色质免疫沉淀(ChIP)


FA裂解缓冲液

50mM 羟乙基哌嗪乙磺酸-氢氧化钾,pH 值7.5

140mM 氯化钠

1mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0

1% 的聚乙二醇辛基苯基醚

0.1% 的去氧胆酸钠

0.1% 十二烷基硫酸钠


蛋白酶抑制剂


RIPA(放射性免疫测定)缓冲液

50mM 三羟甲基氨基甲烷-氯化氢,pH 值8.0

150mM 氯化钠

2mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0

1% 乙基苯基聚乙二醇

0.5% 去氧胆酸钠

0.1% 十二烷基硫酸钠

蛋白酶抑制剂

洗涤缓冲液

0.1% 十二烷基硫酸钠

1% 的聚乙二醇辛基苯基醚

2mM 的乙二胺四乙酸,pH 值8.0

150mM 的氯化钠

20mM 三羟甲基氨基甲烷-氯化氢,pH 值8.0


末次洗涤缓冲液

0.1% 十二烷基硫酸钠

1% 聚乙二醇辛基苯基醚

2mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0

500mM 氯化钠

20mM 三羟甲基氨基甲烷-氯化氢,pH 值8.0


洗提缓冲液

1% 十二烷基硫酸钠

100mM 碳酸氢钠

蛋白酶K

用蒸馏水溶解,浓度为20mg/ml,-20°C 冻存。

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